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Microlute PLR 去除血清和血漿中磷脂的方案-Porvair

更新時(shí)間:2024-04-29瀏覽:393次

Microlute PLR 去除血清和血漿中磷脂的方案-Porvair

MicroluteTM PLR 去除血清和血漿中的磷脂方案

使用MicroluteTM PLR 96孔板或色譜柱,高效可重復(fù)地去除血漿和血清樣品中的磷脂。

1. 上樣

 50-200 μL 血漿或血清樣品分配到每個(gè)孔中。

2. 沉淀

將樣品體積的 3-4 倍的裂解溶劑添加到孔中以沉淀蛋白質(zhì)。

• 推薦溶劑

• 1% 甲酸的乙腈溶液

替代溶劑:1% 甲酸的甲醇溶液

3. 混合

在洗脫前混合兩種溶液以使蛋白質(zhì)沉淀。

選項(xiàng) 1 - 吸液(推薦):

用手動(dòng)、自動(dòng)移液器或自動(dòng)液體處理系統(tǒng)上下吸液 3 – 4 次。

選項(xiàng) 2 - 渦旋

建議采用高速混合以獲得最佳的均質(zhì)蛋白質(zhì)沉淀,同時(shí)確??字g不會(huì)發(fā)生飛濺和污染風(fēng)險(xiǎn)。

4. 洗脫

與傳統(tǒng)的松散填充產(chǎn)品相比,MicrooluteTM PLR 不需要高真空或壓力即可高效、均勻地洗脫樣品*

對(duì)于真空:

施加低于 - 0.1 bar 的真空,持續(xù)3分鐘或直至樣品洗脫完畢。

對(duì)于正壓:

施加小于 3 PSI 的正壓,持續(xù)3分鐘或直至樣品洗脫完畢。


注意:如果磷脂去除或清理不充分,請(qǐng)降低真空或壓力以減慢流速。


*較高的洗脫真空或壓力可能導(dǎo)致磷脂去除效率低下,并可能增加其他基質(zhì)成分(例如蛋白質(zhì))滲透到樣品中的風(fēng)險(xiǎn)。

5. 分析

將洗脫液直接注入到 LC 中,進(jìn)樣前稀釋或蒸發(fā)洗脫液以在進(jìn)樣前重新溶解為更適合分析的溶劑。

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